Monkeypox Virus Pusa PCR Taimi Moni

1. Fa'ata'ita'igaAoina:E tatau ona aoina mea fa'ata'ita'i i totonu o paipa mama e tusa ai

faʻatasi ai ma faʻamatalaga faʻapitoa faʻapitoa.

2. Sauniuniga Reagent (Vaega Sauniuniga Reagent)

Aveese i fafo vaega o le pusa, faapaleni i le vevela o le potu mo le faʻaogaina.

3. Fa'asologa o Fa'ata'ita'iga

3.1 Su'ega nucleic acid

E fautuaina e ave 200μL vai faʻataʻitaʻiga, Pulea lelei ma le Faʻatonuga le lelei mo le faʻaaogaina o le nucleic acid, e tusa ai ma manaʻoga ma faʻataʻitaʻiga o pusa faʻapipiʻi DNA viral.

3.2 Liophilized pauta solo ma fa'aopoopo fa'ata'ita'iga

Sauni Monkeypox Virus Lyophilized premix e tusa ai ma le aofa'i o fa'ata'ita'iga.E tasi le fa'ata'ita'iga e mana'omia le tasi paipa PCR o lo'o iai Lyophilized premix pa'u.Le pulea lelei & pulea lelei e tatau ona fa'atusaina e lua fa'ata'ita'iga.

(1) Fa'aopoopo le 15μL Dissolving Solution i totonu o paipa PCR ta'itasi o lo'o iai Lyophilized premix, ona fa'aopoopo lea o le 5μL fa'ata'ita'iga ua maua mai/ Le lelei Pulea/Positive Control i totonu ole paipa PCR ta'itasi.

(2) Ufiufi lelei paipa PCR, fa'apipi'i lima PCR se'ia mae'a solo ma fa'afefiloi le pa'u lyophilized, fa'aputu le vai i le pito i lalo o paipa PCR e ala i le fa'asao vave.

(3) Afai e fa'aaoga mea faigaluega masani a le PCR mo le su'esu'eina, ona tu'u sa'o loa lea o paipa PCR i le nofoaga fa'alautele;pe a fa'aaoga le BTK-8 mo le su'esu'eina, e mana'omia le fa'atinoina o galuega nei: fa'aliliu le vai 10 μL mai le paipa PCR i le va'aiga lelei o le BTK-8.E tasi le paipa PCR e tutusa ma le tasi vaieli i luga o le pu.I le taimi o le paipa, ia mautinoa o le paipa e 90 tikeri i luga.E tatau ona tu'u i le ogatotonu o le vaieli ma taofi le tuleiina o le paipa pe a o'o i le mea muamua (ina ia aloese ai mai pupuni).A mae'a ona fa'atumu vaieli, ave i fafo se atigipusa fa'afefete e ufiufi uma vaieli ona fa'ae'e atu lea o le pu i le vaega e su'e ai fa'aopoopoga.

4. Fa'ateleina ole PCR (Vaega Su'esu'e)

4.1 Tuu paipa PCR/ tali i totonu o le tane tali ma seti lelei igoa o tali taitasi i le faasologa talafeagai.

4.2 Fa'atulagaina o le fa'amalama o le su'esu'ega: (1) Fa'ama'i o le Monkeypox (FAM);(2) Pulea totonu (CY5).

4.3 Fa'atino le faiga fa'ata'amilosaga o lo'o mulimuli mai

Polokalama a ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

 Polokalama ole BTK-8:

5. I'uga su'esu'ega (fa'amolemole va'ai ile Instrument User Manual)

A maeʻa le tali, o le a otometi lava ona faʻaolaina iʻuga.Kiliki le "Analyze" e iloilo ai, ma o le a otometi lava ona fa'amatalaina e le meafaigāluega le fa'atatau Ct o fa'ata'ita'iga ta'itasi ile koluma fa'ai'uga.O fa'ai'uga fa'atonutonu lelei ma fa'aletonu e tatau ona fa'atatau i le "6. Pulea Lelei ".

6. Puleaina lelei

6.1 Pulea le lelei: Leai Ct poʻo Ct> 40 i le FAM alalaupapa, Ct≤40 i le CY5 alalaupapa faʻatasi ai ma le faʻapipiʻiina masani.

6.2 Pulea lelei: Ct≤35 i le FAM alalaupapa faʻatasi ai ma le faʻalauteleina masani, Ct≤40 i le CY5 alalaupapa faʻatasi ai ma le faʻaogaina masani.

6.3 E aoga le fa'ai'uga pe a fa'amalie uma ta'iala i luga.A leai, o le taunuuga e le aoga.

Fa'amatalaga Fa'ai'uga

O i'uga nei e mafai:

FAAMANATU: Afai e tupu le taunuʻuga le lelei, e manaʻomia le aoina o le faʻataʻitaʻiga ma toe faʻataʻitaʻi.